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| 概要 |
本研究では、マウス歯胚形成過程におけるTβ10の発現様式と機能について解析することを目的とした。in situ Hybridization法を用いたTβ10とTβ4のmRNA発現局在検索の結果、歯胚形成過程においてTβ4mRNAが上皮組織に発現しているのに対し、Tβ10mRNAは主に歯原性間葉由来の組織に発現していた。また、胎生期におけるTβ10 mRNAの発現部位は細胞増殖が活発な部位と一致して...いた。帽状期や鐘状期の歯胚ではTβ10mRNAの発現は主に歯乳頭組織に、Tβ4mRNAの発現はエナメル器に認められた。さらに、出生直後ではTβ10mRNAの発現は前象牙芽細胞と前エナメル芽細胞に、Tβ4mRNAの発現は前エナメル芽細胞にのみ認められた。歯根形成期では、Tβ10 mRNAの発現はヘルトヴィッヒ上皮鞘（Hertwig’s epithelial root sheath, HERS）や、その周囲の歯原性間葉系細胞に認められたが、Tβ4 mRNAの発現は認められなかった。Real-time PCR法を用いたmRNAの定量解析では、下顎においてE10.5よりE12.0に、胎生期歯胚においてはE18.0よりE15.0に、生後歯胚においては生後5日齢（P5）よりP1に、Tβ10とTβ4の発現量増加が認められた。また、胎生期の脳、胸腺、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺におけるTβ10とTβ4のmRNA発現局在を検索した結果、全ての臓器においてTβ10やTβ4の発現が認められ、それらの発現量は胎生期と比較して生後に減少した。siRNAによるTβ10機能阻害下でE11.0下顎とE15.0歯胚を8日間培養し、Tβ10の影響を組織形態学的に検索したところ、Tβ10 siRNA群では有意な歯胚の形態形成不良が認められた。歯胚発育不良の原因を追求するために、細胞増殖活性への影響をKi67免疫組織染色にて、アポトーシスへの影響をTUNEL法にて検索した。その結果、Tβ10 siRNA群の下顎と歯胚に細胞増殖活性の低下が認められた。一方、Tβ10 siRNA群においてアポトーシスへの影響は下顎と歯胚ともに認められなかった。また、マウス歯髄細胞（mDP）とマウス歯原性上皮細胞（mDE6）を用いてsiRNA処理によるTβ10の機能阻害を行ったところ、細胞増殖活性の低下が認められた。これより、Tβ10は主に歯胚を構成する細胞の増殖活性を制御することで、歯胚形成に関与していることが示唆された。本研究により、Tβ10が歯胚形成過程において、時期および部位特異的に発現し、歯胚の発育や形態形成に関与する必須の因子であることが示唆された。続きを見る
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| 目次 |
1. 要旨 2. 緒言 3. 材料と方法 4. 結果 5. 考察 6. 総括 7. 謝辞 8. 参考文献
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